sanger 求蛋白质测序法的原理,

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/28 00:34:28

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Sanger蛋白质测序的策略：
（1）测定蛋白质分子中多肽链的数目
（2）拆分蛋白质分子的多肽链
（3）断开多肽链内的二硫桥
（4）分析每一多肽链的氨基酸组成
（5）鉴定多肽链的N-末端和C-末端残基
（6）裂解多肽链成较小的片段
（7）测定各肽段的氨基酸序列（Edman降解法）
（8）重建完整多肽链的一级结构
（9）确定半胱氨酸残基间形成的S-S交联桥的位置

烃基化反应
Sanger反应( DNFB或 FDNB )
Sanger用来鉴定多肽蛋白质的N末端氨基酸。
详细测序方法请参照王静岩版生物化学，因为太多，不方便敲上去。

sanger 法是指用二硝基氟苯(DNFP)与多肽链上的 N端氨基酸的氨基反应生成DNP-氨基酸在酸性条件下水解多肽链, DNP-氨基酸断裂下来,其余的是多肽链,然后通过纸层析DNP-氨基酸,确定是那种氨基酸.(当然某些氨基酸中的R基上氨基和羟基也可与 DNFP反应,但可通过有机溶剂除去).
ps 1953年英国人sanger用测定了牛胰岛素的氨基酸序列,闻名于世....

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