trizol成分作用是什么最近用trizol 法提取了RNA但不知道它为何物,
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 06:54:53
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在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA制备工作.若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜.在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用.
1.提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞;
2.将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;
3.在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,在手中用力震荡15秒,在室温下(15℃~30℃)放置2~3分钟后,12000g(2℃~8℃)离心15分钟;
4.取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,在室温下(15℃~30℃)放置10分钟,12000g(2℃~8℃)离心10分钟;
5.弃上清,按照每1ml TRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤,涡旋混合,7500g(2℃~8℃)离心5分钟,弃上清;
6.让沉淀的RNA在室温下自然干燥;
用Rnase-free water 溶解RNA沉淀.
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请问TRIZ全称是什么?
triz
用Trizol提取蛋白
对了 用Trizol方法
TRIZOL提取阳性细菌前是否需要用溶菌酶破壁就如题目所困扰,本人想用TRIZOL提取双歧杆菌的RNA.双歧杆菌是革兰氏阳性细菌,细胞壁比较厚,在提取双歧杆菌DNA之前,是需要用溶菌酶破壁,不知道TRIZ
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