PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?引物两侧指的是模板上是序列,不是引物本身。模板退火时会不会形成发夹结构?我用两步法试了一下,还是P不出来。我

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/01 20:07:04
PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?引物两侧指的是模板上是序列,不是引物本身。模板退火时会不会形成发夹结构?我用两步法试了一下,还是P不出来。我

PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?引物两侧指的是模板上是序列,不是引物本身。模板退火时会不会形成发夹结构?我用两步法试了一下,还是P不出来。我
PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?
引物两侧指的是模板上是序列,不是引物本身。
模板退火时会不会形成发夹结构?我用两步法试了一下,还是P不出来。我现在只想把目的带P出来,有杂带可以接受。

PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?引物两侧指的是模板上是序列,不是引物本身。模板退火时会不会形成发夹结构?我用两步法试了一下,还是P不出来。我
不在引物上,应该没啥问题.如果PCR产物特异性差,建议适当提高退火温度或者换用保真度高的酶.
如果非要认为模板特殊结构有影响的话,不妨试着调整一下PCR 缓冲液的成分,针对不同的结构有专用缓冲液.

引物的有效长度不能大于 38 mer,否则最适延伸温度会超过TaqDNA聚合酶的最适温度(74℃),不能保证PCR扩增产物的特异性

退火温度低于反向互补序列形成发夹结构的温度

PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?引物两侧指的是模板上是序列,不是引物本身。模板退火时会不会形成发夹结构?我用两步法试了一下,还是P不出来。我 用基因组DNA做模板进行PCR扩增,设计引物所选序列也用cDNA为模板有什么不同是用这两个模板做pcr,在设计引物时,设计引物所用的序列有区别么 基因组为何PCR 不出条带,测出的浓度为4480ng/ul 基因组PCR和片段质粒PCR一样吗 有什么区别 比如引物量和模板量、温度等等 如何通过设计引物PCR,检测RNA提取中是否有基因组DNA污染 为什么用RNA为模板,以基因组设计引物可以PCR出产物用DNaseI处理后,还是可以PCR出产物,请问还有其他原因吗? PCR引物为什么是DNA,不是RNA 为什么用srap引物跑PCR只有一条带我的模板是火龙果的DNA,模板的质量是过的去的,进行其他扩增是可以的.但是用SRAP引物就不正常了.扩增程序应该没有问题,因为PCR结果可以看到有引物二聚体的 为什么用srap引物跑PCR只有一条带?我的模板是火龙果的DNA,模板的质量是过的去的,进行其他扩增是可以的.但是用SRAP引物就不正常了.扩增程序应该没有问题,因为PCR结果可以看到有引物二聚体 PCR说法不正确的是 A PCR的基本步骤为变性退火延伸B也需要模板DNA RNA C DNA聚合酶参加 D不需要引物 关于细菌基因组PCR的问题向做过细菌PCR的请教:体系一般都是多少,退火温度呢我们做过退火温度有48度、43度、56度,引物是通用引物1492R和27F,模板和引物都没问题,是不是引物和模板不匹配,10 同样的模板,只是引物不同扩增基因组上不同的片段,为什么条带亮度差别很大我是分段扩增一病毒的基因组,用随机引物反转录得到模板,然后进行PCR,采用不同的引物,结果亮度差别太大 DNA模板有RNA污染,做实时PCR有影响么?基因组DNA纯度1.2.0,是RNA污染么?这样的模板做实时PCR有影响么?该怎样解决? PCR无法P出目的条带最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的 pcr 如果把全部模板DNA扩增出来,引物怎么设计 人基因组DNA模板,PCR时条件怎么设置?我需要做重叠PCCR模板是基因组DNA,但没有这方面的经验,需要同道人士帮忙, PCR中DNA聚合酶使引物间连成一条与模板DNA互补的DNA吗? 请从网上搜索大鼠3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的基因组DNA和mRNA序列并设计一对跨外显子的RT-PCR引物(基因组DNA无扩增) 一窍不通, PCR设计的引物为什么是DNA而不是RNA