菌落PCR的TM值和P基因的是不是一样啊连接的是T载体 菌落PCR 条带很暗 有杂带 也不亮 是不是要提高菌落PCR的TM值啊?

菌落PCR的TM值和P基因的是不是一样啊连接的是T载体 菌落PCR 条带很暗 有杂带 也不亮 是不是要提高菌落PCR的TM值啊? 实时PCR产物的Tm值为什么一般是在80以上?Tm值不是DNA的溶解温度吗?它是和我们的PCR退火温度一样吗?要是一样,我们的退火温度一般不都是60多度吗?而Tm值是不是也应该是60多度? 大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp 菌落PCR的具体操作方法 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 菌落pcr是否可以直接扩增基因组上的目的基因?单菌落需要特殊处理吗 追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差别太大,这样可以用吗?是不是内引物条件可以适当放宽?还有,我用的是p pcr反应体系如何建立?我做的是基因组的pcr,想扩增其中一个基因的一段,我设计的引物 上游 GCGTCGACTACAGCCTGTTTCAGCACTT 其中tm值是60.3 G和C的含量是 53.6下游 GCCTTAAGCACCCATTGCACATTCCA 其中tm值是58.3 G和C的 基因和DNA的基本单位是不是一样 菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 引物分哪几种?扩基因所用的引物和做RT-PCR的引物一样吗? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? 为什么基因链接好做完转化之后长出来的菌落做PCR验证没有结果呢,扩增不出来? 菌落PCR和普通PCR区别 退火温度低会对PCR产生什么影响?我做菌落PCR,使用一个特异性上游引物和一个T7下游通用引物,退火温度用的是较低的48度,但引物的Tm分别为57,71,阳性对照都没有出结果,请问是怎么回事呢?退火 求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢? 普通基因扩增和PCR的区别?PCR就是基因扩增么?